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Cryopreservation of banana germplasm
- Authors : Panis, B.
- Document type : Journal article
- Year of publication : 1992
- Journal title : BPTCG Journal
- Pages : 8-9
- Peer-reviewed : No
- ISSN : 0777-6896
- Language(s) : English
- Abstract : A cryopreservation solution containing 7.5 percent dimethylsulphoxide enabled better post-thawing viability. The solution was added gradually for one hour before thawing. The cells were transferred to cryotubes and thawed slowly (less than one degree C per min) in a methanol bath under agitation. At -7.5 C, the tubes were placed in liquid nitrogen for 3 s, returned to the methanol bath, cooled to -40 C and stored in liquid nitrogen. Thawing was carried out by placing the cryotubes in a water bath at 40 C to prevent recrystallisation. Postthawing viability was evaluated by using the 2,4,5-triphenyl tetrazolium chloride reduction test and the fluorescein diacetate test. The cells were transferred to semi-solid medium for regeneration by somatic embryogenesis. The ability to obtain embryogenic cells governs survival of freezing. Description of the advantages of cryopreservation of embryogenic cultures.
[Une solution cryoconservatrice contenant du DMSO (diméthylsulfoxyde) à 7,5 pourcent permet la meilleure viabilité post-décongélation. Cette solution est ajoutée graduellement durant 1 heure, avant la décongélation. Les cellules sont transférées en cryotubes et subissent une lente congélation (-1 degrés C/mn) dans un bain de méthanol sous agitation. A -7,5 degrés C, les tubes sont plongés dans de l'azote liquide pendant 3s. puis replacés en bain de méthanol, refroidis à -40 degrés C et stockés dans de l'azote liquide. La décongélation s'effectue en plaçant les cryotubes dans un bain d'eau à 40 degrés C pour empécher la recristallisation. La viabilité post-décongélation est estimée en utilisant le test de réduction au 2,4,5-triphényl chlorure de tétrazolium et le test au diacétate de fluorescéine. Les cellules sont transférées sur milieu semi-solide pour une régénération par embryogenèse somatique. La capacité à survivre à la congélation dépend de l'obtention de cellules embryogènes. Les avantages de la cryoconservation de suspensions de cultures embryogènes sont décrits.]
- Keywords :
FREEZING;
SOMATIC EMBRYOS;
CELL CULTURE;
PRESERVATION;
VIABILITY
- Open access : No
- Musalit document ID : IN920028
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