Bottlenecks in the generation and maintenance of morphogenic banana cell suspensions and plant regeneration via somatic embryogenesis therefrom

• Authors : Schoofs, H.; Panis, B.; Strosse, H.; Mayo Mosqueda, A.; Lopez Torres, J.; Roux, N.; Dolezel, J.; Swennen, R.


• Document type : Journal article


• Year of publication : 1999


• Journal title : Infomusa


• Volume (number) : 8 (2)




• Pages : 3-7


• Peer-reviewed : No


• ISSN : 1023-0068


• Language(s) : English


• Abstract : During the last decade, Musa embryogenic cell suspensions were successfully initiated from scalps and (fe)male flowers of many genotypes and landraces. The initiation of a banana suspension takes 9 to 26 months depending on the type of explant and landrace. Low embryogenic responses hamper the optimization of the induction and early initiation steps. Only one out of two to one out of five good embryogenic calluses result thus far in a "good" i.e. highly regenerable and transformation-competent suspension. Clearly, their initiation is still far from routine. The main problem related to the use of scalps is the need for a prolonged culture in the presence of very high BA concentrations and its possible effect on the ploidy level. Flow cytometry analysis provides a very powerful tool to quickly determine the ploidy level of starting material and suspensions. This is important, as the initiation of suspensions is so time and labour consuming. Also of prime importance is the cryopreservation of cell suspensions at an early stage as they can get contaminated very quickly, loose their morphogenic potential with time and are prone to somaclonal variation. The first data on somaclonal variation among suspension-derived plants are now available.
  
  [Durant les dix dernières années, des suspensions cellulaires embryogéniques de Musa ont été initiées avec succès à partir de scalps et de fleurs mâle et femelle pour de nombreux génotypes et variétés locales. L'initiation d'une suspension de bananier prend de 9 à 26 mois suivant le type d'explant et la variété. Des réponses embryogéniques faibles ont entravé l'optimisation de l'induction et les premières étapes de l'initiation. Seulement de un sur deux à un sur cinq cals embryogéniques convenables évoluent en une « bonne » suspension hautement régénérable et compétente pour la transformation. En clair, leur initiation est encore loin d'être une routine. Le principal problème relatif à l'utilisation des scalps est la nécessité d'une culture prolongée en présence de concentrations très élevées de BA et de ses effets possibles sur le niveau de ploïdie. L'analyse de cytométrie en flux procure un outil très puissant pour la détermination rapide du niveau de ploïdie du matériel de départ et des suspensions. Ceci est important au vu du temps passé et du travail fourni. Il est aussi de première importance d'obtenir une cryoconservation des suspensions cellulaires à un stade précoce pour se prémunir des contaminations qui peuvent très rapidement survenir, des pertes du potentiel morphogénique qui peuvent s'installer avec le temps et de la variation somaclonale. Les premiers rapports sur la variation somaclonale de plants issus de suspensions cellulaires sont à présent disponibles.]
  
  [Durante la última década, las suspensiones de células embriogénicas de Musa se iniciaban con éxito a partir de los cortes de las flores femeninas y masculinas de muchos genotipos y variedades indígenas. La iniciación de una suspensión toma de 9 a 26 meses dependiendo del tipo de explante y variedad indígena. Las bajas respuestas embriogénicas impiden la optimización de la inducción y los primeros pasos de iniciación. Hasta la fecha, sólo uno de dos o uno de cinco buenos callos embriogénicos dan como resultado una suspensión "buena", es decir altamente regenerable y capaz de transformarse. Está claro que su iniciación está todavía lejos de formar un procedimiento rutinario. El problema principal relacionado con el uso de los cortes consiste en la necesidad de un cultivo prolongado en presencia de muy altas concentraciones de BA y su posible efecto sobre el nivel de ploidia. El análisis mediante la citometría de flujo proporciona una herramienta muy poderosa para determinar con rapidez el nivel de ploidia del material inicial y de las suspensiones. Esto es importante, ya la iniciación de las suspensiones consume mucho tiempo y trabajo. También, de primera importancia es la crioconservación de las suspensiones celulares en una etapa temprana, ya que ellas pueden ser contaminadas rápidamente, pueden perder su potencial morfogénico con el tiempo y estar predispuestas a la variación somaclonal. Actualmente, tenemos los primeros datos sobre la variación somaclonal entre las plantas derivadas de suspensiones.]


• Keywords : PLANTAIN; CULTURE TECHNIQUES; SOMATIC EMBRYOS; MORPHOGENESIS; CELL CULTURE; REGENERATION


• Open access : Yes


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• Musalit document ID : IN990092_eng

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