Genetic transformation in Musa species (banana)

• Chapter Authors : Sági, L.; Remy, S.; Verelst, B.; Swennen, R.; Panis, B.


• Document type : Book section


• Year of publication : 1995


• Book title : Plant protoplasts and genetic engineering VI


• Editors : Bajaj, Y.P.S.


• Publisher(s) : Springer


• Place of publication : Berlin, Heidelberg


• Pages : 214-227


• Language(s) : English


• Abstract : A simple protocol was developed to allow the production of transgenic banana. Embryogenic cell suspensions (Musa spp. cv. 'Bluggoe') were bombarded with particles coated with DNA of foreign genes. Transformed cells were selected with hygromycin and regenerated into plants. Histochemical and molecular characterization of transformants demonstrated that foreign genes were present and expressed in the plants. Bombardment parameters were partially optimized for a modified flowing helium gun resulting in high levels of transient expression of the uidA gene in banana cells. Electroporation conditions were also established for transient expression of introduced DNA in banana protoplasts isolated from regenerable embryogenic cell suspensions of cv. 'Bluggoe'. The maximum frequency of DNA introduction as detected by an in situ assay for transient expression of the uidA gene, amounted to 1.8 percent of total protoplasts. The present method directly provides a basis for functional analysis of promoters in banana.
  
  [Transformation génétique chez des espèces de Musa (bananier)]
  
  [Un protocole simple a été développé afin de permettre la production de bananiers transgéniques. Des suspensions de cellules embryogènes (Musa spp. cv. "Bluggoe") ont été bombardées avec des particules recouvertes d'ADN de gènes étrangers. Des cellules transformées ont été sélectionnées avec de l'hygromycine et régénérées en plantes. La caractérisation histochimique et moléculaire des transformants démontre que des gènes étrangers sont présents et s'expriment dans les plantes. Des paramètres de bombardement ont été partiellement optimisés pour un canon à flux d'hélium modifié résultant en des niveaux élevés d'expression transitoire du gène uidA dans les cellules de bananier. Des conditions d'électroporation ont aussi été établies pour l'expression transitoire d'ADN introduit dans des protoplastes de bananier isolés de suspensions de cellules embryogènes régénérables du cultivar "Bluggoe". La fréquence maximale d'introduction d'ADN, détectée par un dosage in situ de l'expression transitoire du gène uidA, atteint 1,8 pour cent du total des protoplastes. La méthode présente fournit directement une base pour l'analyse fonctionnelle des promoteurs chez le bananier.]
  
  [Transformación genética en especies de Musa (banano)]
  
  [Un simple protocolo fue desarrollado con el fin de permitir la producción de bananos transgénicos. Las suspensiones de células embriogénicas (Musa spp. cv. 'Bluggoe') fueron bombardeadas con partículas revestidas con ADN de genes foráneos. Las células transformadas fueron seleccionadas con la ayuda de higromicina y regeneradas en plantas. La caracterización histoquímica y molecular de las transformaciones demostró la presencia y expresión de los genes foráneos en las plantas. Los parámetros de bombardeo fueron parcialmente optimizados para un cañón de flujo de helio modificado, lo que dio como resultado niveles altos de expresión transitoria del gen uidA en las células de banano. Las condiciones de electroporación también fueron establecidas para la expresión transitoria del ADN introducido en los protoplastos de banano aislados de las suspensiones de células embriogénicas regenerables del cv. 'Bluggoe'. La frecuencia máxima de introducción de ADN detectada por una dosis in situ de la expresión transitoria del gene uidA, estuvo alrededor de 1.8 por ciento del total de los protoplastos. Este método brinda directamente una base para el análisis funcional de los promotores en los bananos.]


• Keywords : PROTOPLASTS; GENETIC ENGINEERING; CELL CULTURE; BLUGGOE ABB; GM BANANA; GENE EXPRESSION; ELECTROPORATION


• Open access : No


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• Musalit document ID : IN960014

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