Droplet vitrification of apical meristems: a cryopreservation protocol applicable to all Musaceae



  • Authors : Panis, B.; Piette, B.; Swennen, R.

  • Document type : Journal article

  • Year of publication : 2005

  • Journal title : Plant Science

  • Volume (number) : 168 (1)


  • Pages : 45-55

  • Peer-reviewed : Yes

  • ISSN : 0168-9452

  • Language(s) : English

  • Abstract : One millimeter sized shoot-tips excised from rooted in vitro plants of the genera Musa and Ensete were successfully cryopreserved with the droplet vitrification technique. We show that the loading phase can be prolonged up to 7 h and that the optimal length of PVS2 treatment is 30-50 min at 0°C. Ultra rapid freezing and thawing rates proved to be essential for high and reproducible post-thaw regeneration rates. This results in an increase of 23-46 percent compared to the normal cryovial freezing protocol. When the optimal procedure was applied to 56 accessions belonging to eight different genomic groups of Musa spp. and one Ensete spp., an average of 52.9 percent post-thaw regeneration was obtained. These results were relatively genotype independent. Only wild diploid Musa acuminata accessions proved to be somewhat more recalcitrant towards cryopreservation though an acceptable average regeneration rate of 39 percent was still obtained. (Author's abstract).

    [Vitrification des gouttelettes de méristèmes apicaux: protocole de cryopréservation applicable à toutes les Musacées. Des extrémités de tiges excisées d'un millimètre provenant de vitroplants des genres Musa et Ensete ont été cryoconservées avec succès par la technique de vitrification en gouttelette. Nous montrons que la phase de chargement peut être prolongée jusqu'à 7 h et que la durée optimale de traitement PVS2 est de 30-50 minutes à 0°C. Les taux de congélation ultra rapide et de dégel se sont avérés être essentiels pour des taux de régénération de post-dégel élevés et reproductibles. Cela aboutit à une augmentation de 23-46 pourcent par rapport au protocole cryovial normal. Quand la procédure optimale a été appliquée à 56 accessions appartenant à huit groupes génomiques différents de Musa spp. et un Ensete spp., une moyenne de régénération post-dégel de 52,9 pourcent a été obtenue. Ces résultats ont été relativement indépendants du génotype. Seules les accessions du diploïde sauvage Musa acuminata se sont avérées être quelque peu récalcitrantes à la cryoconservation quoiqu'un taux moyen de régénération acceptable de 39 pourcent ait été encore obtenu. (Résumé d'Auteur).]

  • Keywords : MERISTEM CULTURE; KEEPING QUALITY; VITRIFICATION; REGENERATIVE ABILITY; CRYOPRESERVATION

  • Open access : No

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  • Musalit document ID : IN050013


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